Guidling Technology vous amène à apprendre la méthode simple et efficace de dessalement et de concentration
Les protéines doivent souvent être dessalées après séparation et purification, et ces sels proviennent principalement de divers ions présents dans les organismes vivants (par exemple, les ions sodium, les ions potassium, les ions chlorure, etc.) ainsi que des sels tampons présents dans les extraits, des sels présents dans les les éluants et les composants salins de certains dénaturants utilisés pour les expériences. Une concentration élevée de sel peut affecter l'activité et la stabilité des protéines ainsi que leurs interactions avec d'autres molécules, générant des signaux interférents ou réduisant la précision des mesures dans les méthodes analytiques ultérieures telles que l'électrophorèse, la spectrométrie de masse et les études cristallographiques. Par conséquent, il est très nécessaire de dessaler les protéines purifiées après séparation, et les principales méthodes de dessalage souvent utilisées sont la chromatographie sur membrane (dialyse et ultrafiltration) et sur gel filtration. De plus, dans certains cas, le dessalement peut également être réalisé par dilution.
Le dessalement par dialyse, en raison du long cycle et de la nécessité d'un grand nombre de fluides de remplacement, son application a été considérablement restreinte, et il est moins utilisé dans l'industrie, mais principalement en partie utilisé en laboratoire, le laboratoire est également progressivement remplacé par des tubes d'ultrafiltration /tasse d'ultrafiltration.
La principale technologie de séparation membranaire utilisée dans le processus de dessalage et de concentration des protéines est l’ultrafiltration. L'ultrafiltration est une technologie de séparation par membrane à haut rendement, faible consommation d'énergie, sans changement de phase, sans ajout de réactifs chimiques, opération facile, conditions douces, capacité à mieux maintenir l'activité des macromolécules biologiques, taux de récupération élevé et autres avantages. , et son utilisation dans la séparation et la purification des protéines présente des avantages uniques.
L'ultrafiltration est une méthode de filtration sur membrane qui utilise une membrane poreuse comme milieu de séparation et s'appuie sur la différence de pression entre les deux côtés de la membrane comme force motrice pour séparer les substances de différents poids moléculaires en solution, jouant ainsi un rôle dans le dessalement, la concentration. et purification. Il s’agit d’une nouvelle méthode développée ces dernières années, la plus adaptée à la concentration ou au dessalement de macromolécules biologiques, notamment de protéines et d’enzymes. La clé de l'application de l'ultrafiltration est le choix de la membrane, les différents types et spécifications de la membrane, la différence de débit d'eau, de coupure de poids moléculaire et d'autres paramètres, elle doit être sélectionnée en fonction des besoins de travail pertinents. De plus, la forme du dispositif d'ultrafiltration, la composition et les propriétés du soluté, la concentration de la solution, etc. ont une certaine influence sur l'effet de l'ultrafiltration.
L'application de la technologie d'ultrafiltration pour le dessalage et la concentration des protéines dans le processus de purification des protéines se caractérise par son aptitude au traitement de grandes quantités de liquides allant de quelques centaines à quelques milliers de litres avec les avantages de simplicité de fonctionnement, de gain de temps. et un taux de récupération élevé des protéines. La méthode d'ultrafiltration est élaborée à partir de tubes d'ultrafiltration pour le traitement de micro-volumes en laboratoire, de coupelles d'ultrafiltration pour le traitement de petits volumes et de systèmes d'ultrafiltration pour un usage industriel.
L'ultrafiltration est subdivisée en ultrafiltration à pression directe et filtration à flux tangentiel, et à l'heure actuelle, la filtration à flux tangentiel est principalement utilisée dans l'industrie, qui est largement utilisée dans le dessalement et le remplacement du tampon.
Ce qui suit est un exemple d'application des cassettes à membrane d'ultrafiltration de Guidling Technology pour le dessalement et la concentration de protéines.
Nous avons utilisé une cassette membranaire {{0}}.11㎡ de 10 kd de taille de pores (G01100010K) pour dessaler et concentrer 500 ml de solution d'hormone de croissance modifiée par PEG à une concentration de 0,2 mg/mL. Tout au long du processus d'ultrafiltration, le taux de dessalement, le taux de récupération des protéines, les conditions de défaillance du flux membranaire et le taux de récupération du flux d'eau ont été examinés.
Avant et après l'utilisation, nous avons testé le flux d'eau de la cassette à membrane séparément et le taux de récupération des cassettes à membrane a atteint 98 % dans le but de maintenir le même débit d'alimentation, la même pression d'alimentation et la même pression de reflux.
L'ensemble du processus a traité un total de 2 L de matériau et a duré 4 0 minutes, 0-5 minutes pour le processus de concentration, 5-35 minutes pour le processus d'échange de liquide et 35-40 minutes. était le processus de surconcentration. Tout au long du processus d'ultrafiltration, le TMP a été stabilisé entre 0,7-0,8 bar, le débit d'alimentation était constant et le flux de matière moyen était de 27 LMH.
2L de matière liquide concentrée échange à 60mL, environ 33 fois concentrée, le taux de dessalement atteint 99%, le taux de récupération atteint 80%, après un lavage, une augmentation de 50mL de liquide, la récupération totale de 88%, production industrielle selon le volume mort des calculs du pipeline, dans la mesure du possible pour augmenter le nombre de fois de lavage supérieur, un lavage supérieur général 3 fois peut être complètement récupéré.
Les cassettes à membrane Guidling Technology sont fabriquées à partir de matériaux inertes de qualité médicale avec une forte résistance à la corrosion et peuvent résister à un nettoyage alcalin puissant ; l'utilisation d'un processus de fabrication automatisé garantit la continuité et la fiabilité de la qualité du produit, une résistance mécanique plus élevée, une résistance à la contre-pression et des performances de rinçage répétées ; il a une super hydrophilie, ce qui peut donner à la membrane un flux plus élevé et une plus faible adsorption des protéines ; nous disposons également d'une conception de canal d'écoulement optimisée avec une perte de charge plus faible, ce qui facilite le transfert de matière et réduit considérablement le temps de filtration.
Nos cassettes membranaires sont disponibles dans une large gamme de tailles de pores, de 1kd à 1000kd. Parmi elles, les cassettes à membrane d'ultrafiltration 1-10kd peuvent être utilisées pour le dessalement et l'élimination des pyrogènes ; Les cassettes membranaires d'ultrafiltration 30kd peuvent être utilisées pour la concentration d'anticorps monoclonaux et le remplacement du tampon ; dans le même temps, nos produits à fibres creuses peuvent également être utilisés pour la concentration et le remplacement de produits biologiques, avec des tailles de pores de 100 kd, 300 kd et 500 kd, qui sont principalement utilisés pour un grand nombre d'applications dans les produits vaccinaux.
Guidling Technology est une entreprise nationale de haute technologie axée sur les produits biopharmaceutiques, la culture cellulaire, la purification et la concentration de fluides biomédicaux, de diagnostic et industriels. Nous avons développé avec succès des dispositifs de filtration centrifuge, des cassettes d'ultrafiltration et de microfiltration, un filtre anti-virus, un système TFF, un filtre en profondeur, des fibres creuses, etc. qui répondent pleinement aux scénarios d'application des produits biopharmaceutiques, de la culture cellulaire, etc. Nos membranes et filtres à membrane sont largement utilisés en concentration, extraction et séparation de préfiltration, microfiltration, ultrafiltration et nanofiltration. Nos nombreuses gammes de produits, depuis les petites filtrations de laboratoire à usage unique jusqu'aux systèmes de filtration de production, en passant par les tests de stérilité, la fermentation, la culture cellulaire et bien plus encore, répondent aux besoins des tests et de la production. Guidling Technology est impatient de coopérer avec vous !
