Le bref processus de purification en aval du vaccin contre la fièvre aphteuse

La fièvre aphteuse est une maladie infectieuse aiguë, chaude et très contagieuse provoquée par le virus de la fièvre aphteuse, qui peut infecter presque tous les animaux à onglons (porcs, bovins, ovins, etc.). C'est la maladie animale la plus contagieuse jamais découverte et la plus dangereuse pour l'élevage.

 

Les principales voies de transmission de la fièvre aphteuse sont les voies digestives et respiratoires, la peau endommagée, les muqueuses et la peau intacte (par exemple la peau de la poitrine), les muqueuses (conjonctive oculaire). Elle peut également être transmise par l'air, ainsi que par l'urine, le lait, le sperme et la salive. La prévention et le contrôle de la fièvre aphteuse dans notre pays se font principalement par la vaccination, et les foyers de fièvre aphteuse sont chassés. La vaccination est un moyen efficace de prévention spécifique de la fièvre aphteuse.

 

La vaccination est un moyen fiable et efficace de prévention spécifique de la fièvre aphteuse, et un vaccin sûr et efficace est une condition préalable à la prévention, au contrôle et à l'élimination réussie de la fièvre aphteuse. Les vaccins atténués et inactivés et d'autres vaccins conventionnels ont une bonne immunogénicité et jouent un rôle important dans la prévention et le contrôle de la fièvre aphteuse. Cependant, les épidémies de fièvre aphteuse dans certaines parties du monde semblent être liées au virus vivant résiduel dans les vaccins inactivés en raison de facteurs dangereux tels qu'une forte virulence virale, une inactivation incomplète des virus et des usines de traitement des virus vivants qui s'échappent. D'où la recherche d'un vaccin antiaphteux plus sûr et plus efficace. Avec le développement rapide de la technologie de la biologie moléculaire, des vaccins génétiquement modifiés contre le virus de la fièvre aphteuse (FMDV), tels que le vaccin sous-unitaire, le vaccin nourrissable, le vaccin à peptides synthétiques, le vaccin porteur de protéines, le vaccin à délétion génique, le vaccin porteur vivant, le vaccin à acide nucléique, etc., font leur apparition.

 

Procédé de production d'un vaccin atténué/inactivé contre la fièvre aphteuse

 

Technologie de production d'un vaccin génétiquement modifié contre le virus de la fièvre aphteuse

 

Filtration de clarification

 

Membrane de filtration profonde : La technologie de filtration est largement utilisée dans le processus de production de produits biologiques tels que les vaccins, parmi lesquels la technologie de filtration DC est généralement utilisée dans le processus de récolte du venin de maladie pour séparer les impuretés insolubles telles que les débris cellulaires. Au début de la clarification du virus de la fièvre aphteuse, la technologie de filtration de surface représentée par l'élément filtrant à membrane pliable a été principalement adoptée. Avec le changement des conditions de culture, l'augmentation des impuretés des débris cellulaires, la filtration de surface est difficile à obtenir l'effet de clarification, et comme la charge de filtration de surface est faible, le coût des matériaux filtrants devient de plus en plus élevé.

Dans le contexte ci-dessus, la filtration profonde est de plus en plus utilisée dans le processus de séparation du cytoliquide du virus de la fièvre aphteuse et constitue l'une des méthodes de récolte les plus utilisées à l'heure actuelle. La membrane filtrante profonde est généralement composée de cellulose, d'auxiliaires de filtration poreux (tels que la terre de diatomées) et d'auxiliaires de filtration à ions chargés positivement, et les canaux formés après le film sont souvent très tortueux, similaires à la structure d'ouverture en labyrinthe. Les particules d'impuretés sont souvent piégées à l'intérieur du matériau filtrant plutôt qu'à la surface, et la paroi du canal filtrant absorbe souvent certaines impuretés de particules extrêmement fines par action électrostatique ou force intermoléculaire. En raison de l'ajout d'auxiliaires de filtration, la filtration profonde peut également éliminer certaines impuretés solubles, réduisant ainsi la pression des étapes de purification ultérieures.

 

Cependant, lorsque l'échelle de culture est trop grande, un grand nombre de membranes filtrantes profondes sera nécessaire, ce qui entraînera une augmentation substantielle du coût des consommables. Dans le même temps, la forte densité de culture cellulaire réduira la charge de la membrane filtrante profonde, ce qui entraînera une augmentation des coûts et une dilution excessive du produit.

Microfiltration La méthode de microfiltration, l'utilisation principale du dispositif de filtration à flux tangentiel, les composants de la membrane sont la cassette à membrane plate et la fibre creuse. La filtration à flux tangentiel (TFF) est entraînée par la différence de pression transmembranaire. Les substances et les impuretés plus petites que la taille des pores de la membrane traversent la membrane, tandis que les impuretés telles que les cellules avec des particules plus grosses sont piégées. La taille des pores de la membrane utilisée pour la microfiltration est de {{0}}.45/0.22μm. La microfiltration à flux tangentiel à fibres creuses peut traiter directement les liquides à haute teneur en solides, tels que les milieux de culture cellulaire à haute densité, peut éliminer les étapes de centrifugation et de préfiltration, moins d'étapes, un fonctionnement simple, la membrane peut être utilisée à plusieurs reprises grâce au nettoyage, réduisant les investissements en équipement et les coûts d'exploitation, conformément aux exigences de la production automatisée modulaire.

 

Ultrafiltration(Changement de concentration)

 

L'ultrafiltration peut éliminer une partie du faible poids moléculaire de diverses protéines et des impuretés liées au processus, telles que les inactivateurs, et réduire considérablement le volume de liquide récolté, ce qui est propice aux opérations de traitement ultérieures. Méthode d'ultrafiltration, l'utilisation principale du dispositif de filtration à flux tangentiel, les composants de la membrane ont une enveloppe de membrane et deux fibres creuses, dans des circonstances normales, l'application du système d'ultrafiltration peut rendre la concentration de virus de plus de 100 fois, le taux d'élimination de diverses protéines jusqu'à 99 %. Parmi eux, les composants de la membrane à fibres creuses présentent les avantages d'une force de cisaillement douce et faible, pas facile à boucher, un fonctionnement flexible, une longue durée de vie et un faible coût, et facile à agrandir, il est donc recommandé de choisir la fibre creuse pour l'enrichissement et la purification des virus.

Lors de l'utilisation de la méthode d'ultrafiltration pour concentrer le liquide, il est très important de sélectionner une ouverture de membrane appropriée, qui détermine directement l'efficacité de la concentration et la qualité du produit. D'une part, il est nécessaire de sélectionner l'ouverture de la membrane pour piéger efficacement les molécules cibles afin de garantir le rendement, et d'autre part, l'effet d'élimination et la vitesse de traitement des hétéroprotéines doivent être pleinement pris en compte. Par conséquent, le meilleur principe est de sélectionner la membrane avec la plus grande taille de pores qui peut piéger la molécule cible, et d'essayer de sélectionner la membrane filtrante avec une distribution de taille de pores uniforme.

Pour les vaccins atténués/inactivés contre la fièvre aphteuse, la membrane d'ultrafiltration à ouverture de 100-750kd est généralement utilisée pour achever l'interception du virus de la fièvre aphteuse. Pour les vaccins génétiquement modifiés contre la fièvre aphteuse, une ouverture de membrane de 3-6 fois (de préférence 5 fois) le poids moléculaire de la substance cible est généralement sélectionnée.

 

GuidageTechnologie

Hangzhou Guidling Technology Co., Ltd. est une entreprise nationale de haute technologie axée sur la production, qui se concentre sur la clarification, la séparation et la purification en aval des produits biopharmaceutiques. Les produits sont largement utilisés dans les vaccins, les anticorps monoclonaux, les diagnostics, les produits sanguins, le sérum, les endotoxines et d'autres processus de filtration de produits biologiques. Nous avons une « cassette à membrane plate », une « colonne à fibres creuses », un « dispositif de filtration à flux tangentiel », un « filtre à virus », une « pile à membrane profonde », un « filtre à bactéries » et d'autres produits. Nous avons une large gamme de lignes de produits, de la petite filtration de laboratoire jetable aux systèmes de filtration de production, pour répondre aux besoins de test et de production. Guidling Technology a hâte de coopérer avec vous !